AAV在眼部注射方法有哪些
肺部注射包括鼻内滴注法和气管插管术。鼻内滴注法操作简单,直接将病毒悬液滴入鼻腔,但颗粒可能沉积在上呼吸道,需要较大剂量的病毒。气管插管术能将病毒载体直接输入肺部,避免上呼吸道损失,但需特殊设备和技巧。此外,还有气管内注射,操作与鼻内滴注法类似,但直接注入气管。
然而,基于AAV载体的基因治疗通常采用视网膜下腔注射,要求高技能操作,增加视网膜脱离风险,并受限于横向扩散能力,只能感染注射中心附近一小部分视网膜细胞。玻璃体腔注射避免了这些问题,是一种常用的安全、简便的递送方式。但缺乏高效且特异性转导视网膜细胞的AAV载体。
然而,基于AAV载体的眼病基因治疗通常需要视网膜下腔注射,这需要经验丰富的专家进行,增加视网膜脱离的风险。AAV横向扩散能力有限,只能感染注射中心附近的一部分视网膜细胞。玻璃体腔注射能避免这些问题,是一种常用、安全、操作简单的递送方式。
) 麻醉小鼠,确保其对疼痛刺激无反应。2) 保护小鼠眼睛,保持湿润并抑制眨眼反射。3) 保持小鼠体温,防止麻醉后过低。4) 清洁小鼠耳朵,并消毒。5) 打开鼓室大疱,暴露镫骨动脉和圆窗膜。6) 轻轻在圆窗膜中心穿刺,观察液体流出。7) 将0.6~2μL的AAV载体注射至耳蜗鼓阶。
心血管系统研究中常用的注射方式包括尾静脉注射、心肌定点注射、心包内注射和血管夹闭注射等。每种方法都有其特点和适应范围。例如,心肌定点注射需要对操作过程有严格控制,确保病毒载体能够精准送达心肌细胞。心包内注射则通过直接将病毒注入心包腔内,实现对心脏组织的靶向感染。
心肌注射通过直接注入心脏组织,实现高效转导,但表达不均匀;尾静脉注射操作简便,但特异性较弱,需较高病毒滴度;颈静脉注射需手术操作,对动物有伤害性;冠状动脉注射,尤其是逆向冠状动脉注射,能实现微创递送,但在内皮细胞屏障下,转导效率相对较低。