AAV在眼部注射方法有哪些
最后,AAV的注射方式包括脑立体定位、脑室注射等,这些方法能够实现基因在特定神经区域的精确表达。以脑立体定位为例,如图9所示,通过AAV9结合CamKIIα特异性启动子在小鼠海马区进行注射,可以实现基因在兴奋性神经元的特异性表达。
AAVRec2血清型通过系统注射途径能够高效、特异地转导脂肪组织,且其靶向性可通过给药方式(如口服或腹腔注射)进行调整,以适应不同脂肪组织类型。启动子的选择决定了基因表达的特异性和空间性。
注射方式包括定点或多点注射,减少脱靶效应和病毒用量。对于内脏脂肪等难感染部位,腹腔注射AAVRec2成为有效策略。以具体案例为例,通过调控Slpi表达影响Mecp2Adi KO小鼠的棕色脂肪功能,这显示出rAAV在脂肪组织研究中的实际应用。
在神经系统中,特异性相对更强的启动子选择尤为重要,常见的神经组织特异性启动子包括巨细胞病毒启动子CMV、CMV增强子融合的鸡-肌动蛋白启动子CAG等。此外,AAV载体上转录后调控元件的添加,如内含子和WPRE元件,对于提高外源基因表达具有重要意义。
对于需要直接靶向的策略,肠系膜动脉注射不可忽视,尽管它涉及到手术操作。具体步骤包括异氟醚麻醉、脾脏区域穿刺、SMA暴露并固定,然后使用微血管放大器处理并注射定制针头。注射后,记得妥善移除器械,恢复血液流动。在选择注射方法和剂量时,我们建议您在预实验阶段进行个性化调整。